новости
В МИРЭА — РТУ разработали метод получения липоксигеназ млекопитающих для структурных и биохимических исследований
Коллективу удалось наладить биотехнологическое производство и очистку четырех изоформ липоксигеназ (ALOX) — ферментов, окисляющих полиненасыщенные жирные кислоты и играющих ключевую роль в воспалении, ферроптозе и ряде других патологий. Ранее получать эти белки в препаративных количествах было серьезной задачей.
Суть метода — экспрессия ALOX в E. coli в виде N-концевых His-тег-слитых белков с последующей периодической ферментацией с подпиткой (fed-batch). Такой подход обеспечивает высокий выход и позволяет получать очищенные ферменты в миллиграммовых количествах на литр культуры.
Результат — готовые белковые препараты, пригодные для скрининга ингибиторов, получения антител и прямого структурного анализа, в том числе с использованием синхротронного излучения. Это открывает путь к рациональному дизайну лекарств, нацеленных на липоксигеназные пути метаболизма.
Практическая значимость работы выходит далеко за пределы лаборатории: такие научные шаги со временем становятся частью повседневной жизни. Понимание работы липоксигеназ приближает создание новых противовоспалительных препаратов с меньшими побочными эффектами, более точной диагностики заболеваний и методов борьбы с нейродегенеративными болезнями — Альцгеймера, Паркинсона, последствиями инсультов. Кроме того, сам метод получения «трудных» белков можно применить и к другим ферментам, расширяя возможности биотехнологии в целом.
По результатам работы опубликована статья в журнале Metabolites: «Mammalian Arachidonic Acid 15-Lipoxygenases: Fed-Batch Fermentation, Enzyme Purification and Functional Characterization». Работа выполнена в рамках проекта «Разработка органических и гибридных материалов с применением методов молекулярной биотехнологии и биоинженерии в области живых систем и биоэнергетики», реализуемого ФГБОУ ВО «МИРЭА — РТУ» при грантовой поддержке Минобрнауки России в рамках ФНТП СИН.
Дирекция НТП осуществляет сопровождение реализации Федеральной научно-технической программы развития синхротронных и нейтронных исследований и исследовательской инфраструктуры на период до 2030 года и дальнейшую перспективу по заданию Минобрнауки России.